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行業資訊
過氯化氫酶定性實驗過程及操作方法--氯化氫
返回列表    打印本頁    發布時間:2012-6-27 10:40:44

1.取4支干凈的試管,按a  b  c對照編號。放在試管架上備用。氯化氫

2.在A   B  C試管內分別加入 5ml10ml15ml的活性污泥混合液,再在A和B試管中分別加10 ml5 ml蒸餾水。在對照管內加15 ml蒸餾水。

3.在A   B   C  及對照管中分別加入O2%的淀粉液若干滴(淀粉液的用量,在做預備實驗時根據樣品中淀粉酶含量多少而定),迅速搖勻并記下反應的初始時間。

4.在上述4個管內分別加若干滴碘液(碘液用量在預備實驗時酌定),迅速搖勻,這時各管均呈藍色。

5.觀察結果。注意各管的變化,記下各管藍色完全消失時的時間(即淀粉酶和淀粉反應完全的時間),并對結果進行分析。

()細菌淀粉酶在固體培養基中的擴散實驗

1.將肉膏胨淀粉瓊脂培養基加熱融化,待冷至45左右倒人無菌培養皿內(每皿約10 ml),共倒3個,靜置待冷凝即成平板。

2.在無菌操作條件下,用接種環分別挑取枯草桿菌、大腸桿菌和活性污泥各一環分別在3個平板上點種5個點。倒置于37恒溫箱內培養2448 h

3.觀察結果,取出平板,分別在3個平板內菌落周圍滴加碘液,觀察菌落周圍顏色的變化。若在菌落周圍有一個無色的透明圈,說明該細菌產生淀粉酶并擴散到基質中去。若菌落周圍仍為藍色,說明該細菌不產生淀粉酶。

()氯化氫酶的定性測定

1.將配備的枯草桿菌和大腸桿菌斜面各1支放在試管架上。

2.用滴管吸取過氧化氫滴加入兩管菌種斜面上,有氣泡產生的為接觸酶陽性(有過氧化氫酶);無氣泡產生的為接觸酶陰性(無過氯化氫酶)